Plazma vaječného žloutku jako alternativa k séru v kultivačních médiích

Abstract

Buněčné kultury se rutinně používají v řadě laboratoří a jsou jedním z hlavních nástrojů výzkumu v biomedicínských vědách. Kultivační média umožňující proliferaci eukaryotických buněk mají velmi komplexní složení. Pro kultivaci většiny buněk je třeba k základnímu složení přesně definovaného média doplnit ještě chemicky nedefinovanou složku, jíž je standardně fetální bovinní sérum (FBS). Nevýhodou FBS je jeho cena, ale i etické otázky spojené s jeho získáváním. Cílem této práce bylo ověření možnosti využít plazmu vaječného žloutku (EYP) jako alternativu k FBS v kultivačním médiu. Práce má část teoretickou a praktickou. V teoretické části jsou popsány základy kultivace buněk, kultivační média, etické problémy spojené se získáváním FBS. Diskutovány jsou možnosti náhrady FBS s důrazem na EYP. Experimentální část se zabývala optimalizací přípravy EYP a hodnocením viability a proliferace MG-63 buněk kultivovaných v médiu s EYP místo FBS. Pro udržení viability buněčné linie byla zjištěna optimální koncentrace EYP v kultivačním médiu 50 %. Ukázali jsme, že buněčnou linii MG-63 je sice možné pěstovat v kultivačním médiu s přídavkem EYP místo FBS, ale proliferace buněk dosahovala pouze 30 % ve srovnání se standardním médiem s FBS.