Stanovení znaků H2AX a Ki67 u extrakorporální fotoferézy

Abstract

Extrakorporální fotoferéza je metoda známá již od 80. let 20 století. Tato bakalářská práce se zabývá jejím znovuobjevením a využitím při kontrole kvality transfuzních přípravků, pomocí stanovení histonu H2AX, antigenu Ki67 a kaspázy 3. Cílem práce bylo ověřit, zda ECP poskytuje stejné výsledky jako ozáření vzorků gama zářením a nalézt vhodný protokol, který by umožnil sledování kvality vzniklého transfuzního přípravku. U vzorků při-pravených ozářením UVA nebo gama zářením bylo pomocí průtokové cytometrie sledováno zastoupení H2AX, Ki67 a kaspázy 3. Bylo ověřeno, že vzorky ozářené UVA zářením pomocí extrakorporální fotoferézy poskytují shodné výsledky jako vzorky ozářené gama zářením. Vlivem záření docházelo k velmi výrazným zlomům, které byly sledovány expresí histonu H2AX. Po ozáření nedochází k proliferaci buněk ve vzorku. Proliferace byla sledována po stimulaci vzorků mitogenem (PHA) a expresí Ki67. Po ozáření buňky vstupují do apoptózy, což bylo ověřeno detekcí kaspázy 3. Během psaní této bakalářské práce byl navržen vhodný protokol, který umožňuje sledování kvality vzniklého transfuzního přípravku.

Description

Subject(s)

gvhd, ecp, gama záření, h2ax, ki67, kaspáza 3

Citation

OPEN License Selector